Pure Saposhnikovia divaricata nga lana alang sa paghimo sa kandila ug sabon nga pakyawan nga diffuser importante nga lana bag-o alang sa reed burner diffusers
mubo nga paghulagway:
2.1. Pag-andam sa SDE
Ang mga rhizome sa SD gipalit isip usa ka uga nga hilba gikan sa Hanherb Co. (Guri, Korea). Ang mga materyales sa tanum gikumpirma sa taxonomically ni Dr. Go-Ya Choi sa Korea Institute of Oriental Medicine (KIOM). Usa ka specimen sa voucher (numero 2014 SDE-6) ang gideposito sa Korean Herbarium of Standard Herbal Resources. Ang mga uga nga rhizome sa SD (320 g) gikuha kaduha nga adunay 70% nga ethanol (nga adunay 2 h reflux) ug ang kinuha gikonsentrar sa ilawom sa pagkunhod sa presyur. Ang decoction gisala, lyophilized, ug gitipigan sa 4 ° C. Ang abot sa pinauga nga kinuha gikan sa krudo nga mga materyales sa pagsugod kay 48.13% (w/w).
Ang Chromatographic analysis gihimo gamit ang HPLC system (Waters Co., Milford, MA, USA) ug usa ka photodiode array detector. Alang sa pagtuki sa HPLC sa SDE, ang prim-O-glucosylcimifugin standard gipalit gikan sa Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industry (Gyeongsan, Korea), ugsec-O-glucosylhamaudol ug 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol gilain sa sulod sa among laboratoryo ug giila pinaagi sa spectral analysis, panguna sa NMR ug MS.
Ang mga sample sa SDE (0.1 mg) natunaw sa 70% nga ethanol (10 mL). Ang Chromatographic separation gihimo gamit ang XSelect HSS T3 C18 column (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Ang mobile phase naglangkob sa acetonitrile (A) ug 0.1% acetic acid sa tubig (B) sa usa ka flow-rate nga 1.0 mL/min. Ang usa ka multistep gradient nga programa gigamit sama sa mosunod: 5% A (0 min), 5-20% A (0-10 min), 20% A (10-23 min), ug 20-65% A (23-40 min). ). Ang wavelength sa detection gi-scan sa 210-400 nm ug natala sa 254 nm. Ang gidaghanon sa indeyksiyon mao ang 10.0μL. Ang mga standard nga solusyon alang sa pagdeterminar sa tulo ka chromones giandam sa katapusang konsentrasyon nga 7.781 mg/mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31.125 mg/mL (4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol), ug 31.125 mg/mL (sec-O-glucosylhamaudol) sa methanol ug gitipigan sa 4°C.
2.3. Pagtimbang-timbang sa Anti-Inflammatory ActivitySa Vitro
2.3.1. Kultura sa Cell ug Sample nga Pagtambal
Ang RAW 264.7 nga mga selula nakuha gikan sa American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) ug gipatubo sa DMEM medium nga adunay 1% antibiotics ug 5.5% FBS. Ang mga selula gilumlum sa usa ka humidified nga atmospera nga 5% CO2 sa 37 °C. Aron mapukaw ang mga selula, ang medium gipulihan sa bag-ong DMEM medium, ug lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) sa 1μg/mL gidugang sa presensya o pagkawala sa SDE (200 o 400μg/mL) alang sa dugang nga 24 ka oras.
2.3.2. Determinasyon sa Nitric Oxide (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α), ug Interleukin-6 (IL-6) Production
Ang mga selula gitambalan sa SDE ug gipukaw sa LPS sulod sa 24 ka oras. WALAY produksiyon ang gisusi pinaagi sa pagsukod sa nitrite gamit ang Griess reagent sumala sa miaging pagtuon [12]. Ang pagtago sa makapahubag nga mga cytokine PGE2, TNF-α, ug ang IL-6 gitino gamit ang ELISA kit (R&D system) sumala sa mga instruksiyon sa tiggama. Ang mga epekto sa SDE sa NO ug produksiyon sa cytokine gitino sa 540 nm o 450 nm gamit ang Wallac EnVision™microplate reader (PerkinElmer).
2.4. Pagtimbang-timbang sa Kalihokan sa AntiosteoarthritisSa Vivo
2.4.1. Mga mananap
Ang laki nga Sprague-Dawley nga ilaga (7 ka semana ang edad) gipalit gikan sa Samtako Inc. (Osan, Korea) ug gipapuyo ubos sa kontrolado nga mga kondisyon nga adunay 12-h nga kahayag/ngitngit nga siklo sa°C ug% humidity. Ang mga ilaga gihatagan ug laboratory diet ug tubigad libitum. Ang tanan nga mga pamaagi sa eksperimento gihimo sa pagsunod sa mga giya sa National Institutes of Health (NIH) ug giaprobahan sa Animal Care and Use Committee sa unibersidad sa Daejeon (Daejeon, republika sa Korea).
2.4.2. Induction sa OA nga adunay MIA sa Rats
Ang mga mananap gi-random ug gi-assign sa mga grupo sa pagtambal sa wala pa ang pagsugod sa pagtuon (matag grupo). MIA nga solusyon (3 mg/50μL sa 0.9% saline) direkta nga giindyeksyon sa intra-articular nga wanang sa tuo nga tuhod ubos sa anesthesia nga gipahinabo sa usa ka sinagol nga ketamine ug xylazine. Ang mga ilaga gibahin nga random ngadto sa upat ka mga grupo: (1) ang saline nga grupo nga walay MIA injection, (2) ang MIA nga grupo nga adunay MIA injection, (3) ang SDE-treated nga grupo (200 mg/kg) nga adunay MIA injection, ug (4) ) ang indomethacin- (IM-) nga gitambalan nga grupo (2 mg/kg) nga adunay MIA injection. Ang mga ilaga gipangalagad nga binaba sa SDE ug IM 1 ka semana sa wala pa ang MIA injection sulod sa 4 ka semana. Ang dosis sa SDE ug IM nga gigamit niini nga pagtuon gibase sa mga gigamit sa miaging mga pagtuon [10,13,14].
2.4.3. Mga Pagsukod sa Hindpaw Weight-Bearing Distribution
Human sa OA induction, ang orihinal nga balanse sa gibug-aton nga kapabilidad sa hindpaws nabalda. Usa ka incapacitance tester (Linton instrumentation, Norfolk, UK) gigamit sa pagtimbang-timbang sa mga pagbag-o sa gibug-aton nga pagtugot. Ang mga ilaga maayo nga gibutang sa lawak sukdanan. Ang gibug-aton-pagdala nga pwersa nga gigamit sa pangulahiang bahin sa aberids sa usa ka 3 s nga panahon. Ang ratio sa pag-apud-apod sa gibug-aton gikalkulo pinaagi sa mosunod nga equation: [kabug-at sa tuo nga likod nga bahin/(gibug-aton sa tuo nga likod nga bahin + gibug-aton sa wala nga bahin sa likod)] × 100 [15].
2.4.4. Pagsukod sa Serum Cytokine Levels
Ang mga sample sa dugo gi-centrifuge sa 1,500 g sulod sa 10 min sa 4 ° C; dayon ang serum gikolekta ug gitipigan sa −70 ° C hangtod magamit. Ang lebel sa IL-1β, IL-6, TNF-α, ug PGE2 sa serum gisukod gamit ang ELISA kits gikan sa R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) sumala sa mga instruksyon sa tiggama.
2.4.5. Real-Time Quantitative RT-PCR Analysis
Ang kinatibuk-ang RNA gikuha gikan sa tuhod joint tissue gamit ang TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), reverse-transcribed ngadto sa cDNA ug PCR-amplified gamit ang TM One Step RT PCR kit nga adunay SYBR green (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, USA). Ang real-time quantitative PCR gihimo gamit ang Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR system (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Ang primerong mga han-ay ug ang probe-sequence gipakita sa Table1. Ang mga alyquot sa sample nga cDNA ug parehas nga kantidad sa GAPDH cDNA gipadako sa TaqMan® Universal PCR master mixture nga adunay DNA polymerase sumala sa mga panudlo sa tiggama (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Ang mga kondisyon sa PCR mao ang 2 min sa 50 ° C, 10 min sa 94 ° C, 15 s sa 95 ° C, ug 1 min sa 60 ° C sa 40 ka mga siklo. Ang konsentrasyon sa target nga gene gitino gamit ang comparative Ct (threshold cycle number sa cross-point tali sa amplification plot ug threshold) nga pamaagi, sumala sa mga instruksiyon sa tiggama.
Presyo sa FOB:US $0.5 - 9,999 / Piraso
Min. Gidaghanon sa Order:100 ka piraso / piraso
Abilidad sa Supply:10000 Piraso / Piraso kada Bulan
Ang Osteoarthritis (OA) mao ang labing kanunay nga musculoskeletal disorder ug ang labing komon nga degenerative joint disease sa mga tigulang.1]. Ang OA usa ka kondisyon nga gipahinabo sa bahin sa kadaot, pagkawala sa istruktura ug pag-obra sa cartilage, ug dysregulation sa proinflammatory ug anti-inflammatory nga mga agianan [2,3]. Kini nag-una nga makaapekto sa articular cartilage ug subchondral bone sa synovial joints ug moresulta sa joint failure, nga mosangpot sa kasakit sa pagpabug-at lakip na ang paglakaw ug pagbarog [4].
Walay tambal alang sa OA, tungod kay lisud kaayo nga ibalik ang cartilage sa higayon nga kini maguba [5]. Ang mga tumong sa pagtambal mao ang paghupay sa kasakit, pagpadayon o pagpalambo sa hiniusang paglihok, pagdugang sa kalig-on sa mga lutahan, ug pagpamenos sa mga epekto sa sakit. Ang mga pagtambal sa pharmacological sa OA nagtumong sa pagpakunhod sa kasakit aron madugangan ang hiniusang function ug kalidad sa kinabuhi sa pasyente. Bisan kung ang pagkaguba sa cartilage mao ang panguna nga panghitabo sa OA, ang pagkadaot sa collagen mao ang sukaranan nga insidente nga nagtino sa dili mabag-o nga pag-uswag sa OA kauban ang panghubag [6,7]. Ang mga pagtambal nga adunay anti-inflammatory ug chondroprotective nga kalihokan gilauman nga mahupay ang kasakit ug mapadayon ang integridad sa matrix sa mga pasyente sa OA.
Busa, ang pagkunhod sa panghubag lagmit nga mapuslanon sa pagdumala sa OA. Ang mga bag-ong pagtuon nagsugyot sa mga papel sa pagpanalipod alang sa mga kahinguhaan sa herbal sa pag-uswag sa OA, sa mga termino sa pagpagaan sa panghubag sa chondrocyte ug dugang nga pagkaguba sa cartilage, pinaagi sa ilang abilidad sa pagpakig-uban sa hiniusang-kauban nga mga tisyu, nga miresulta sa pagpagaan sa joint pain [8].
Ang gamut saEspesye sa tanom nga bulak ang Saposhnikovia divaricataAng Schischkin (Umbelliferae) kaylap nga gigamit sa tradisyonal nga tambal alang sa pagtambal sa sakit sa ulo, sakit, panghubag, ug arthritis sa Korea ug China [9,10]. Ang lainlaing mga epekto sa pharmacological saEspesye sa tanom nga bulak ang Saposhnikovia divaricata(SD) naglakip usab sa anti-inflammatory, analgesic, antipyretic, ug antiarthritic properties [9,11]. Usa ka bag-o nga pagtuon nagpakita nga ang SD chromone extract adunay potensyal nga antirheumatoid arthritis nga mga epekto sa usa ka modelo sa mouse sa collagen-induced arthritis [10]; apan, pipila ka mga pagtuon ang gihimo aron pagsuporta sa anti-inflammatory ug antiarthritis nga kalihokan saEspesye sa tanom nga bulak ang Saposhnikovia divaricatakinuha (SDE).
Busa, ang kasamtangan nga pagtuon nagsusi sa anti-inflammatory ug antiosteoarthritis nga mga kalihokan sa usa ka 70% nga ethanol extract sa SD. Una, gisusi ang anti-inflammatory nga epekto sa SDEsa vitrosa LPS-induced RAW 264.7 cells. Sunod, ang antiosteoarthritis nga epekto sa SDE gisukod pinaagi sa pag-assess sa gibug-aton nga pag-apud-apod, pagkadaut sa articular cartilage, ug mga tubag sa panghubag sa usa ka modelo sa ilaga sa monosodium iodoacetate- (MIA-) nga gipahinabo nga OA.