Ang Osteoarthritis (OA) kay usa sa mga long-term chronic degenerative bone joint disease nga nakaapekto sa mga tigulang nga populasyon nga sobra sa 65 anyos.
1]. Kasagaran, ang mga pasyente sa OA nadayagnos nga adunay nadaot nga cartilage, nanghubag nga synovium, ug naguba nga mga chondrocytes, nga nagpahinabog kasakit ug pisikal nga kasakit [
2]. Ang sakit sa arthritis kasagaran tungod sa pagkadaot sa cartilage sa mga lutahan pinaagi sa paghubag, ug kung ang cartilage grabe nga nadaot ang mga bukog mahimong magbangga sa usag usa hinungdan sa dili maagwanta nga kasakit ug pisikal nga kalisud [
3]. Ang pagkalambigit sa makapahubag nga mga tigpataliwala nga adunay mga sintomas sama sa kasakit, paghubag, ug pagkagahi sa lutahan maayo nga dokumentado. Sa mga pasyente sa OA, ang makapahubag nga mga cytokine, nga maoy hinungdan sa pagbanlas sa cartilage ug subchondral bone makita sa synovial fluid [
4]. Duha ka dagkong reklamo nga kasagarang naa sa mga pasyente sa OA mao ang kasakit ug paghubag sa synovial. Busa ang panguna nga mga katuyoan sa karon nga mga terapiya sa OA mao ang pagpaubos sa kasakit ug panghubag. [
5]. Bisan kung ang magamit nga mga pagtambal sa OA, lakip ang non-steroidal ug steroidal nga mga tambal, napamatud-an nga epektibo sa paghupay sa kasakit ug panghubag, ang dugay nga paggamit niini nga mga tambal adunay grabe nga sangputanan sa kahimsog sama sa cardiovascular, gastro-intestinal, ug renal dysfunctions [
6]. Sa ingon, ang usa ka labi ka epektibo nga tambal nga adunay gamay nga epekto kinahanglan nga maugmad alang sa pagtambal sa osteoarthritis.
Ang mga natural nga produkto sa kahimsog labi nga nabantog tungod kay luwas ug dali magamit [
7]. Ang tradisyonal nga mga tambal sa Korea napamatud-an nga epektibo batok sa daghang mga sakit nga makapahubag, lakip ang arthritis [
8]. Aucklandia lappa DC. nailhan tungod sa mga medisina niini, sama sa pagpausbaw sa sirkulasyon sa qi alang sa paghupay sa kasakit ug paghupay sa tiyan, ug gigamit sa tradisyonal nga paagi isip usa ka natural nga analgesic [
9]. Ang nangaging mga taho nagsugyot nga ang A. lappa adunay anti-inflammatory [
10,
11], analgesic [
12], anticancer [
13], ug gastroprotective [
14] mga epekto. Ang lain-laing mga biological nga mga kalihokan sa A. lappa tungod sa mga nag-unang aktibo nga compounds niini: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone ug costuslactone [
15]. Ang una nga mga pagtuon nag-ingon nga ang costunolide nagpakita sa anti-inflammatory properties sa lipopolysaccharide (LPS), nga nag-aghat sa mga macrophage pinaagi sa regulasyon sa NF-kB ug heat shock protein pathway [
16,
17]. Bisan pa, walay pagtuon nga nagsusi sa mga potensyal nga kalihokan sa A. lappa alang sa pagtambal sa OA. Ang karon nga panukiduki nag-imbestigar sa mga terapyutik nga epekto sa A. lappa batok sa OA gamit ang (monosodium-iodoacetate) MIA ug acetic acid-induced rodent nga mga modelo.
Ang Monosodium-iodoacetate (MIA) kay bantog nga gigamit sa paghimo sa kadaghanan sa mga kinaiya sa kasakit ug mga pathophysiological nga bahin sa OA sa mga mananap [
18,
19,
20]. Kung gi-inject sa mga lutahan sa tuhod, ang MIA makaguba sa metabolismo sa chondrocyte ug makapukaw sa panghubag ug makapahubag nga mga sintomas, sama sa cartilage ug subchondral bone erosion, ang mga sintomas sa kardinal sa OA [
18]. Ang pagtubag sa writhing nga gipahinabo sa acetic acid kaylap nga giisip nga simulation sa peripheral nga kasakit sa mga mananap diin ang makapahubag nga kasakit mahimong masukod sa quantitatively [
19]. Ang mouse macrophage cell line, RAW264.7, kay popular nga gigamit sa pagtuon sa cellular nga mga tubag sa panghubag. Sa pagpaaktibo sa LPS, ang RAW264 macrophage nagpalihok sa mga agianan sa panghubag ug nagpagawas sa daghang mga tigpataliwala sa pagpanghubag, sama sa TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, ug IL-6 [
20]. Kini nga pagtuon nag-evaluate sa anti-nociceptive ug anti-inflammatory nga mga epekto sa A. lappa batok sa OA sa MIA animal model, acetic acid-induced animal model, ug LPS-activated RAW264.7 cells.
2. Mga Materyal ug Pamaagi
2.1. Materyal sa Tanum
Ang uga nga gamot sa A. lappa DC. gigamit sa eksperimento nakuha gikan sa Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). Giila kini ni Prof. Donghun Lee, Dept. of Herbal pharmacology, Col. of Korean Medicine, Gachon University, ug ang voucher specimen number gideposito nga 18060301.
2.2. Pagtuki sa HPLC sa A. lappa Extract
Ang A. lappa gikuha gamit ang reflux apparatus (distilled water, 3 h sa 100 °C). Ang gikuha nga solusyon gisala ug gipamub-an gamit ang usa ka low-pressure evaporator. Ang A. lappa extract adunay abot nga 44.69% human sa freeze-drying ubos sa −80 °C. Chromatographic analysis sa A. lappa gihimo uban sa usa ka HPLC konektado sa paggamit sa usa ka 1260 InfinityⅡ HPLC-system (Agilent, Pal Alto, CA, USA). Para sa chromatic separation, ang EclipseXDB C18 column (4.6 × 250 mm, 5 μm, Agilent) gigamit sa 35 °C. Usa ka kinatibuk-an nga 100 mg sa espesimen ang lasaw sa 10 mL nga 50% nga methanol ug sonicated sa 10 min. Ang mga sample gisala gamit ang syringe filter (Waters Corp., Milford, MA, USA) nga 0.45 μm. Ang komposisyon sa mobile phase mao ang 0.1% phosphoric acid (A) ug acetonitrile (B) ug ang kolum gi-eluted sama sa mosunod: 0-60 min, 0%; 60–65 min, 100%; 65–67 min, 100%; 67-72 min, 0% solvent B nga may flow rate nga 1.0 mL/min. Ang effluent naobserbahan sa 210 nm gamit ang injection volume nga 10 μL. Ang pag-analisar gihimo sa triplicate.
2.3. Balay ug Pagdumala sa Hayop
Ang laki nga Sprague-Dawley (SD) nga mga ilaga nga nag-edad og 5 ka semana ug laki nga ICR nga mga ilaga nga nag-edad og 6 nga mga semana gipalit gikan sa Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). Ang mga mananap gitago sa usa ka lawak gamit ang kanunay nga temperatura (22 ± 2 °C) ug humidity (55 ± 10%) ug usa ka kahayag/itom nga siklo sa 12/12 ka oras. Ang mga mananap pamilyar sa kondisyon sulod sa sobra sa usa ka semana sa wala pa magsugod ang eksperimento. Ang mga mananap adunay ad libitum nga suplay sa feed ug tubig. Ang kasamtangang etikal nga mga lagda alang sa pag-atiman ug pagdumala sa mananap sa Gachon University (GIACUC-R2019003) hugot nga gisunod sa tanang pamaagi sa eksperimento sa mananap. Gidisenyo ang pagtuon nga buta sa imbestigador ug parallel nga pagsulay. Gisunod namo ang pamaagi sa euthanasia sumala sa mga giya sa Animal Experimental Ethics Committee.
2.4. MIA Injection ug Pagtambal
Ang mga ilaga random nga gibahin sa 4 ka grupo, nga mao ang sham, control, indomethacin, ug A. lappa. Ingon nga anesthetized sa 2% isofluorane O2 mixture, ang mga ilaga gi-injected gamit ang 50 μL sa MIA (40 mg / m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) intra-articularly ngadto sa mga lutahan sa tuhod aron mosangpot sa experimental OA. Ang mga pagtambal gihimo sama sa ubos: kontrol ug mga sham nga grupo gipadayon lamang sa AIN-93G nga batakang pagkaon. Lamang, ang indomethacin nga grupo gihatagan og indomethacin (3 mg / kg) nga gilakip sa AIN-93G nga pagkaon ug ang A. lappa 300 mg / kg nga grupo gi-assign sa AIN-93G nga pagkaon nga gidugangan sa A. lappa (300 mg / kg). Ang mga pagtambal nagpadayon sulod sa 24 ka adlaw sukad sa adlaw sa OA induction sa rate nga 15-17 g kada 190-210 g nga gibug-aton sa lawas kada adlaw.
2.5. Pagsukod sa Timbang
Pagkahuman sa OA induction, ang pagsukod sa kapasidad nga nagdala sa gibug-aton sa mga hind limbs sa mga ilaga gihimo uban ang incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) ingon nga gikatakda. Ang pag-apud-apod sa gibug-aton sa pangulahiang mga tiil gikalkulo: kapasidad sa pagdala sa gibug-aton (%)
